杀稻瘟菌素 S HCl(Blasticidin S HCl (10 mg/mL))

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杀稻瘟菌素 S 是从灰色链霉菌中分离出的一种肽基核苷类抗生素。它是细菌和真核细胞中蛋白合成的强效抑制剂,同时对真菌、线虫和肿瘤细胞也具有活性。杀稻瘟菌素 S 通过阻断释放因子诱导的肽基-tRNA 水解而起作用,并抑制肽键形成。可用作哺乳动物细胞和细菌细胞的选择剂。建议的工作浓度介于 1 至 30 µg/mL 之间,具体取决于细胞系,用于细菌选择的浓度为 25–100 µg/mL。迅速发生细胞死亡,可在不到一周内生成对杀稻瘟菌素稳定耐药的哺乳动物细胞系。

携带 BSR 和 BSD(分别从蜡样芽孢杆菌 K55-S 和土曲霉中分离出)可获得杀稻瘟菌素 S 抗性。BSR 抗性基因编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化杀稻瘟菌素 S 转化为脱氨基羟基杀稻瘟菌素 S。脱氨基羟基稻瘟菌素 S 是杀稻瘟菌素 S 的非生物活性衍生物,不与原核或真核核糖体相互作用,也不抑制原核或真核核糖体。BSD 抗性基因也编码杀稻瘟菌素 S 脱氨酶,该酶催化与 BSR 脱氨酶类似的反应。为了进行细菌选择,LB 培养基的盐含量必须保持低水平(低于 90 mM),pH 值不应超过7.0,以维持杀稻瘟菌素 S 的活性。建议使用杀菌曲线,以确定杀灭非耐药性细胞的杀稻瘟菌素 S 有效浓度下限。

应用
查看哺乳动物细胞、大肠杆菌和酵母菌中杀稻瘟菌素选择的详细方案



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