赛默飞自动细胞计数仪使用说明

赛默飞自动细胞计数仪使用说明

    赛默飞细胞计数仪作为现代实验室细胞研究的关键设备，以其自动化、高精度和便捷性取代了传统的人工计数。掌握规范的赛默飞细胞计数仪使用说明，是确保细胞实验数据可靠、实验可重复的基础。本文将为您梳理标准操作流程、关键步骤与注意事项。

一、设备准备与样品处理

    在启动设备前，充分的准备至关重要。这是赛默飞细胞计数仪使用说明的首要步骤，直接影响后续结果的准确性。

    仪器与耗材准备：

    确保赛默飞细胞计数仪已接通电源并完成预热（如需）。检查设备是否清洁，特别是载物台和镜头。

    准备好仪器专用的细胞计数板（如Countess系列载玻片）或一次性计数卡，确保其洁净且在有效期内。

    细胞样品制备：

    将待计数的细胞悬液轻柔、充分地混匀，以获得具有代表性的样品。这是避免计数误差的关键环节。

    台盼蓝染色（活/死细胞鉴别）：如需评估细胞活力，取少量细胞悬液与等体积的台盼蓝溶液（通常为0.4%）混合，室温孵育1-2分钟。活细胞会排斥染料不着色，而死细胞会被染成蓝色。注意染色后需在5-10分钟内完成计数。

二、标准操作流程步骤

    遵循正确的步骤是获取可靠数据的核心。以下为通用的赛默飞细胞计数仪使用说明流程。

    首要步骤：上样

    使用移液器，吸取约10-20微升已制备好的细胞悬液（或经台盼蓝染色的混合液）。

    将液体垂直、缓慢地滴加到专用细胞计数板的加样孔中，依靠虹吸作用自动充满计数腔。注意避免产生气泡，气泡会干扰成像和计数。

    对于某些型号（如Countess3），只需将加样后的计数板平稳推入仪器指定插槽即可。

    第二步：启动与分析

    在赛默飞细胞计数仪的触摸屏或连接的电脑软件上，选择相应的检测程序。通常需要设置：

    细胞类型：选择通用细胞或特定类型（如CHO、HEK293等），这会影响图像识别算法。

    检测参数：如需区分死活细胞，需在软件中勾选“台盼蓝"选项。

    样本稀释倍数（如果样品在加样前已被稀释）。

    点击“计数"或“开始"按钮，仪器将自动完成对焦、拍摄图像和分析计算。

    第三步：数据读取与记录

    分析完成后，屏幕将显示关键结果，通常包括：

    细胞总浓度（cells/mL）

    活细胞浓度（cells/mL）与细胞存活率（Viability，%）

    平均细胞直径（μm）

    细胞团簇信息

    屏幕同时会显示拍摄的细胞图像，可直观查看计数视野内细胞的分布和形态，辅助判断结果的可靠性。

    及时记录或导出数据。仪器通常支持将结果直接传输至电脑或USB设备。

三、关键注意事项与故障排查

    遵循赛默飞细胞计数仪使用说明的同时，以下几点有助于提升操作成功率与数据质量。

    样品浓度控制：理想浓度范围因型号而异，浓度过高会导致细胞重叠，被识别为一个细胞团，造成计数偏低；浓度过低则统计误差增大。可通过预实验摸索合适的稀释倍数。

    避免气泡与污染：加样时手法要稳，气泡会占据成像区域导致有效分析面积减少。每次使用后，按说明书清洁仪器载物台；一次性耗材严禁重复使用。

    定期校准与维护：为确保长期准确性，需按照厂商建议，定期使用标准品对赛默飞细胞计数仪进行校准。保持光学部件的清洁。

    图像复核习惯：不要依赖自动数据。养成在获取数据后，查看仪器捕捉的图像的习惯。观察细胞分散是否均匀、是否有大量团块、死活细胞染色对比是否明显，以此判断计数结果的可靠性。如果图像质量差，应重新制备样品并检测。

四、总结与实践

    总而言之，规范的赛默飞细胞计数仪使用说明强调的是一套标准化的操作流程：从制备均匀、浓度适中的细胞悬液开始，到正确上样避免气泡，再到合理设置软件参数并养成复核图像的习惯。

    将这流程固化为标准操作程序（SOP），是保证细胞计数结果精确、可比的核心。正确使用赛默飞细胞计数仪，不仅能显著提升实验效率，更能为细胞培养、药物筛选、细胞功能研究等下游实验提供坚实可靠的数据起点。建议新用户在操作前详细阅读具体型号的用户手册，并进行充分的练习以掌握操作细节。