如何选择优质胎牛血清？

　　血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。血清中含有各种血浆蛋白、 多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进 细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。

　　胎牛血清应取自剖腹产的胎牛;新牛血清取自出生24小时之内的新生牛;小牛血清取自出生10-30天的小牛。

　　显然，胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

　　胎牛血清 产品描述：

　　1、胎牛血清，是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，其组成成份大部分已知，但还有一部分尚不清楚，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。

　　2、胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界， 与新生牛和小牛血清相比，抗体含量明显降低，故抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低，是理想的细胞生长补充剂。

　　胎牛血清 功能：

　　1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

　　2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

　　3.有些情况下 结合蛋白质能与有毒金属和 热原质结合，起到解毒作用。

　　4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

　　5.起酸碱度 缓冲液作用。

　　6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

　　-20℃，避光。

　　在选择血清时，应格外留意筛选内毒素：

　　1.养干细胞时，干细胞对内毒素非常敏感，如果血清中内毒素≥3EU/ml时，干细胞很容易死亡。很多使用者，在血清在试用前，就通过提早审核该批次《检测报告》，以决定是否入围进行试用。2.养免疫细胞时，过高的内毒素可诱导免疫细胞释放炎症因子，抑制小鼠红细胞集落的形成等。3.基因敲除相关的细胞实验，培养的细胞要尽可能保持其原始状态，任何引导细胞衰老或凋亡的试剂，都会让后续的实验结果“失之毫厘，谬以千里”。在准备血清和其他试剂时，选择极低的内毒素(最好≤1EU/ml)，对实验至关重要;4.原代培养、杂交瘤融合、细胞转染，或者肝细胞、神经细胞、内皮等难养细胞的扩增，这些都需要挑选好的血清给细胞以有力支持。因此，挑选更低的内毒素，是保证实验顺利的第一步。5.实验室有些细胞，需要长期培养、长期冻存，或者经常复苏、经常培养的，血清会经常或长时间作用于细胞。为保证细胞的健康，都应该选用更低内毒素的血清，以避免内毒素长久对细胞的毒性影响。 总之，血清中内毒素含量过高，更容易导致细胞“亚健康”，造成数据不准，或细胞状态不良、老化、甚至死亡，导致试验中断失败。血清中的内毒素越低越好。

　　内毒素含量越低的血清，级别就越高，以胎牛血清为例：

　　当血清中内毒素含量≤10EU/ml时，此血清为特级胎牛血清;

　　当血清中内毒素含量﹥10EU/ml，≤ 25EU/ml时，此血清为优级胎牛血清;

　　当血清中内毒素含量≥ 25EU/ml时，此血清为标准级胎牛血清。

　　储存条件：

　　-20°C冻存。

　　胎牛血清首次解冻后，应按单次习惯用量分装，分装后的血清仍-20°C冻存。

　　若置于4°C的血清，应在一周内用完。

　　为保证细胞培养的最佳效果，血清和培养基的配置，应遵循“现用现配”原则。配好的培养液，应于一周内用完。

　　血清避免反复冻融，避免在4°C或更高温度储存过久，否则会破坏血清中有效活性成分，影响血清品质。

　　胎牛血清 使用说明：

　　血清从-20℃取出后，融化，按推荐体积加入到基础培养基中，混匀，制备成新鲜完全培养基。(整个操作需在无菌超净台中进行，注意无菌操作。)

　　关于热灭活：胎牛血清不推荐热灭活。

　　热灭活一般是指在做免疫相关的试验中，通过加热灭活掉血清中的补体，以避免对免疫试验的影响。在胎牛血清中，由于胎龄原因，尚未形成完整的补体系统，因此，胎牛血清不会真正干预免疫试验。故不需灭活。并且，热灭活反而可能导致胎牛血清中部分重要的生长因子的活性衰减，进而影响细胞培养效果。若针对某些特殊试验，对于胎牛血清一定要做热灭活，国际上推荐热灭活的方法：40℃水浴,20min。