产品概述:
Thermo Scientific Bond-Breaker TCEP 溶液(中性 pH 值)是无硫醇的含膦 TCEP 化合物的一种稳定 0.5M 溶液,可用作 10X 储备液,用于添加至 SDS-PAGE 样品上样缓冲液以还原蛋白二硫键。
Bond-Breaker TCEP 溶液(中性 pH 值)的特点:
•无味—与 DTT 和 β-ME 不同,TCEP 无气味,有助于营造更健康的实验室环境
•高效—5 至 50 mM TCEP 可在数分钟内彻底还原大多数肽或蛋白二硫键(即,与 DTT 一样高效)
•特异性—甚至可对极稳定的水溶性烷基二硫化物进行选择性和完全还原
•快速—在室温和 pH 值为 5 的条件下可于五分钟内还原蛋白二硫化物
•稳定—耐空气氧化;非挥发性,且不会与蛋白中发现的其他官能团发生反应
•通用—可在广泛 pH 值、盐、去污剂和温度条件下还原肽和蛋白
•兼容—在大多数应用(例如,组氨酸标签蛋白纯化、马来酰亚胺偶联)前无需去除还原剂,因为 TCEP 不含有巯基基团
Bond-Breaker TCEP 溶液是一种强效、无味、无硫醇还原剂,广泛应用于蛋白和涉及二硫键还原的其他研究。本产品是含 B-巯基乙醇或 DTT 的 SDS-PAGE 样品缓冲液的高效便利替代物。该试剂的中性 pH 值可提供清晰的条带并避免蛋白暴露于 TCEP·HCl 的强酸,后者可导致水解和碳水化合物改性。
使用 Bond-Breaker TCEP 溶液的注意事项:
• 可在广泛 pH 值(pH 值 4.0-9.0)和温度(5 至 95°C)条件下进行还原。
• 无需使用变性剂即可高效还原大多数蛋白。然而,加入变性剂(如盐酸胍)可能有助于将内部二硫化物暴露于固定化 TCEP。·
•不推荐将尿素用作变性剂,因为它会形成与巯基基团发生反应的氰酸盐。
•请勿使金属接触 TCEP 溶液,因为这会降低 TCEP 活性。
•在还原过程中,向样品缓冲液中加入 5 至 20 mM EDTA 有助于防止二价金属(如 Zn 2+、Cu 2+ 和 Mg 2+)对巯基基团进行再氧化。
•还原样品应在还原后立即使用,因为二硫化物会随时间重新形成。