产品概述:
Thermo Scientific™ Pierce™ Lys-C 蛋白酶,MS 级是一种高度纯化的天然内蛋白酶,经验证可在蛋白质组学应用中实现最大活性和稳定性。
MS 级 Lys-C 蛋白酶的特点包括:
•增强消化— 与胰蛋白酶一起使用以减少胰蛋白酶遗漏的切割
•增加序列覆盖率— 通过具有互补色谱、电离和碎裂特性的重叠肽获得更好的蛋白质表征
•多功能性— 有效高度变性条件下的酶活性(例如 8 M 尿素)
• C 末端赖氨酸切割特异性— 对于复杂蛋白质样品至少 90%
•稳定性— 以冻干形式提供
产品详细信息
这是一种质谱 (MS) 级丝氨酸蛋白酶,从 Lysobacter enzymogenes 中分离出来。Lys-C 蛋白酶对赖氨酸残基具有高活性和特异性,与胰蛋白酶相比,产生更大的肽和更少的样品复杂性(即更少的肽)。与胰蛋白酶不同,Lys-C 蛋白酶可以先裂解赖氨酸,然后再裂解脯氨酸,因此非常适合顺序消化蛋白质,然后用胰蛋白酶来减少错过的裂解。这些独特的 Lys-C 蛋白酶特性确保了单独使用或随后进行胰蛋白酶消化时的高消化效率。此外,Lys-C 原型肽通常具有更高的电荷状态,使其成为用于 ETD 片段化的首选酶。
Lys-C 蛋白酶通常用于磷酸肽富集工作流程,因为它会生成在 N 端和 C 端均具有伯胺的肽,从而允许用胺反应性同量异位标签对片段进行双重标记。由于在 MS3 采集过程中可以重新分离更多碎片离子,因此可以增强肽离子化并改善定量限。该酶可用于溶液内或凝胶内消化工作流程,以生产用于 LC-MS/MS 蛋白质鉴定的肽。这种 Lys-C 酶是冻干包装的(20 µg 或 100 µg 数量)。
内切蛋白酶 Lys-C 特异性水解赖氨酸羧基侧的蛋白质。在 37°C 下,2 小时内即可完成高效的蛋白质消化。Lys-C 蛋白酶在高度变性的条件下保持活性,例如 8 M 尿素、2 M 胍-HCl、1% SDS、2% CHAPS 和 40% 乙腈,并且在 pH 7–9 内发挥良好作用(在 pH 8 时具有最大活性)。这种冻干酶的质量为 30 kDa,在 –20°C 下可稳定保存 1 年。
应用
• 提高蛋白质消化的序列覆盖率
• 从头测序
• 表观遗传学研究
• 蛋白质的凝胶内和溶液内消化